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荧光显微镜已成为一个研究生物分子
点击次数:951 更新时间:2017-11-22
   荧光显微镜已成为一个研究生物分子
  在过去的几十年中,荧光显微镜已成为一个研究生物分子,途径和在活细胞,组织和整体动物动力学的各种各样的*的工具。相反)其他技术(如电子显微镜,荧光成像是与正在保持文化,使一个大跨度的时间尺度上发生的事件微创光学观察细胞兼容。
  在空间分辨率方面,包括正电子发射断层扫描,磁共振成像和光学相干断层扫描技术,可以产生动物和人类受试者在10厘米和10微米之间的决议的图像,而电子显微镜和扫描探针技术具有zui高空间决议,往往接近分子和原子水平。
  这两个之间在解决权力在于光学显微镜。除了能够形象的活细胞,荧光显微镜的所有形式(包括广角,激光扫描,旋转盘,多光子,和全内反射的zui显著的缺点)所带来的好处是空间分辨率的限制。
  滤色系统是荧光显微镜的重要部位,由激发滤板和压制滤板组成。滤板型号,各厂家名称常不统一。滤板一般都以基本色调命名,前面字母代表色调,后面字母代表玻璃,数字代表型号特点。如德国产品(Schott)BG12,就是种蓝色玻璃,B是蓝色的*个字母,G是玻璃的*个字母;我国产品的名称已统一用拼音字母表示,如相当于BG12的蓝色滤板名为QB24,Q是青色(蓝色)拼音的*个字母,B是玻璃拼音的*个字母。不过有的滤板也可以透光分界滤长命名,如K530,就是表示压制滤长530nm以下的光而透过530nm以上的光。还有的厂家的滤板*以数字命名,如美国Corning厂的NO:5-58,即相当于BG12。
  激发滤板根据光源和荧光色素的特点,可选用以下三类激发滤板,提供一定波长范围的激发光。
  紫外光激发滤板:此滤板可使400nm以下的紫外光透过,阻挡400nm以上的可见光通过。
  紫外蓝光激发滤板:此滤板可使300~450nm范围内的光通过。
  紫蓝光激发滤板:它可使350~490nm的光通过。
  zui大吸收峰在500nm以上者的荧光素(如罗达明色素)可用蓝绿滤板(如B-7)激发。
  近年开始采用金属膜干涉滤板,由于针对性强,波长适当,因而激发效果比较玻璃滤更好。如西德Leitz厂的FITCKP490滤板和罗达明的S546绿色滤板,均远比玻璃滤板效果好。
  激发滤板分薄厚两种,一般暗视野选用薄滤板,亮视野荧光显微镜可选用厚一些。基本要求是以获得zui明亮的荧光和的背景为准。

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