荧光显微镜的基本构造通常由普通光学显微镜再加一些如荧光光源、激发滤片、双色束分离器及阻断滤片等附件的基础上组成。同时采用的荧光光源一般为超高压汞灯，它可发出各种波长的光，且每种荧光物质都会有一个产生强荧光的激发光波长，这时需加置激发滤片，通常有紫外、紫色、蓝色及绿色激发滤片，仅需使一定波长的激发光透过并照射到标本上，并将其他光都吸收掉。

　　二、影响到荧光显微镜成像效果的因素

　　影响荧光显微镜成像的荧光因素很多，主要包括：荧光样品的制备，荧光光源的选择，滤片转盘的设计，荧光滤片的组合策略（激发光滤片，发射光滤片，双色镜分光滤片，带宽选择），显微镜物镜种类，显微镜摄像系统的选择等问题。荧光的激发、滤光、成像、淬灭，荧光实验的调整就是怎么才能协调好以上因素得到好的效果，其中影响到成像效果的一个重要因素即是荧光光源。

　　三、荧光显微镜光源种类及介绍

　　荧光显微镜的常用光源通常都是白光光源：高压汞灯，氙灯，金属卤素灯和LED白光光源以及的LED单波长光源。

　　1、汞灯

　　超高压汞灯（50-200W），它是用石英玻璃制作，中间呈球形，内充一定数量的汞，工作时由两个电极间放电，引起汞蒸发，球内气压迅速升高，当汞*蒸发时，可达50～70个标准大气压力，这一过程一般约需5～15min。

　　2、氙灯

　　氙灯和汞灯做为白光源，都能提供从紫外到近红外一系列波长的光，但它们却有着不同的激发光谱。汞灯集中在近紫外、蓝光以及绿光附近，这种在峰值的高激发能量确保产生明亮的荧光信号，但光毒性却很强。

　　3、金属卤素灯

　　目前各大显微镜品牌广泛使用的一种光源，它和汞灯的激发光谱很像，但它和显微镜以光纤相连，能散热，寿命更长。光纤从光源连到显微镜上，可以大量减少光产生的热能。金属卤素灯对活细胞成像的另一个优势是内置强度设计装置，可以容易调节激发光。也可以通过选择直接连接获得更好的激发效果。

　　4、LED白光荧光光源

　　这种光源的开关在毫秒间，减少样品在光照下的暴露时间，延长寿命。另外，LED光的衰减即快又精确，长期活细胞试验下可大大减少光毒性。和白光相比，LED仅仅在一个较窄的光谱激发，多个LED波段使得LED光源能为多色荧光提供应用。

　　5.LED单波长荧光光源

　　此类光源属于的荧光光源，价格昂贵。采用单波长LED模块设计，输出单个波长的荧光谱线，例如365nm/488nm/561nm/633nm,类似于激光光源。此类优点突出；寿命长，采用光电快速切换，有效避免物理震动。LED单模块光源的单色性好，极大的降低了白光光源的背景噪音，高效激发。程序控制适合整合到的成像系统中。

　　四、总结

　　在过去的十几年中荧光显微镜以惊人的速度在进化，与荧光显微镜密切相关的荧光染料及探针不断被发明，光电技术发展同样迅速，创新的激光共聚焦成像技术，多光子成像技术，脉冲激发技术，高灵敏度固态探测器，高数值孔径物镜和各种不断开发出来的基于计算机图像分析方法，帮助生物医学研究者进一步深入调查基于荧光的生物现象，让研究者深入探究在自然环境中在活细胞内。同时免疫荧光在医学研究、诊断领域里的广泛应用，FISH、各种荧光蛋白技术分别在基因组学、蛋白质组学研究方面的推广，生物医学科研对仪器需要越来越高，先进的的荧光仪器和配件的发展将毫无疑问地继续。