正置荧光显微镜的滤色系统是如何工作的?
点击次数:827 更新时间:2021-04-12
正置荧光显微镜的滤色系统是如何工作的?
正置荧光显微镜是以紫外线为光源,用以照射被检物体,使之发出荧光,然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。细胞中有些物质,如叶绿素等,受紫外线照射后可发荧光;另有一些物质本身虽不能发荧光,但如果用荧光染料或荧光抗体染色后,经紫外线照射亦可发荧光,正置荧光显微镜就是对这类物质进行定性和定量研究的工具之一。
滤色系统是荧光显微镜的重要部位,由激发滤板和压制滤板组成。滤板型号,各显微镜厂家名称常不统一。滤板一般都以基本色调命名,前面字母代表色调,后面字母代表玻璃,数字代表型号特点。
1.激发滤板根据光源和荧光色素的特点,可选用以下三类激发滤板,提供一定波长范围的激发光。
紫外光激发滤板:此滤板可使400nm以下的紫外光透过,阻挡400nm以上的可见光通过。常用型号为UG-1或UG-5,外加一块BG-38,以除去红色尾波。
紫外蓝光激发滤板:此滤板可使300~450nm范围内的光通过。常用型号为ZB-2或ZB-3,外加BG-38。
紫蓝光激发滤板:它可使350~490nm的光通过。
最大吸收峰在500nm以上者的荧光素(如罗达明色素)可用蓝绿滤板(如B-7)激发。开始采用金属膜干涉滤板,由于针对性强,波长适当,因而激发效果比较玻璃滤更好。激发滤板分薄厚两种,一般暗视野选用薄滤板,亮视野荧光显微镜可选用厚一些。基本要求是以获得最明亮的荧光和*背景为准。
2.压制滤板压制滤板的作用是*阻挡激发光通过,提供相应波长范围的荧光。与激发滤板相对应,常用以下3种压制滤板:
紫外光压制滤板:可通过可见光、阻挡紫外光通过。能与UG-1或UG-5组合。
紫蓝光压制滤板:能通过510nm以上波长的光(绿到红),能与BG-12组合。
紫外紫光压制滤板:能通过460nm以上波长的光(蓝到红),可与BG-3组合。